hoaithuong209
New Member
Download miễn phí Thử nghiệm hoạt tính estrogen của mầm hạt đậu nành
Hàm lượng estradiol của lô chứng cắt 2 noãn sào giảm đạt ý nghĩa thống kê
so với lô chứng bình thường, chứng tỏ mô hình nghiê n cứu gây giảm năng
sinh dục đạt.
Hàm lượng estradiol của lô uống thuốc đối chiếu estradiol valerate liều 0,5
mg/kg cao hơn so với hàm lượng estradiol của lô chứng,đạt ý nghĩa thống
kê ở độ tin cậy 95%.
Hàm lượng estradiol của lô uống bột mầm Đậu nànhliều 10 mg/kg cao hơn
so với hàm lượng estradiol của lô chứng nhưng chưa đạt ý nghĩa thống kê ở
độ tin cậy 95%. Hàm lượng estradiol của lô uống bột mầm Đậu nành liều
50 mg/kg cao hơn so với hàm lượng estradiol của lô chứng đạt ý nghĩa
thống kê ở độ tin cậy 95%.
Để tải bản Đầy Đủ của tài liệu, xin Trả lời bài viết này, Mods sẽ gửi Link download cho bạn sớm nhất qua hòm tin nhắn.
Ai cần download tài liệu gì mà không tìm thấy ở đây, thì đăng yêu cầu down tại đây nhé:
Nhận download tài liệu miễn phí
Tóm tắt nội dung tài liệu:
THỬ NGHIỆM HOẠT TÍNH ESTROGEN CỦAMẦM HẠT ĐẬU NÀNH
TÓM TẮT
Mục tiêu: Hạt Đậu nành (Glycine max) là nguồn nguyên liệu chứa nhiều
genistein, đây là một loại isoflavonoid có hoạt tính estrogen, được dùng như
một liệu pháp hormon thay thế HRT (hormone replacement therapy). Những
thử nghiệm dược lý đã chứng minh các flavonoid trong mầm hạt Đậu nành có
thể hỗ trợ cho các trường hợp thiểu năng estradiol trên chuột thí nghiệm.
Đối tượng &phương pháp nghiên cứu: Thử nghiệm trên chuột nhắt trắng với
test Elisa, Atswood và thử nghiệm khảo sát tác động của estradiol trên sự tăng
trọng.
Kết quả: Thử nghiệm ELISA đã chứng minh rằng cho chuột nhắt trắng dùng
bột mầm Đậu nành sau 15 ngày có tác dụng phục hồi sự giảm hàm lượng
estradiol trên chuột bị giảm năng sinh dục, không thể hiện tác dụng kiểu
estrogen trên chuột bình thường. Bằng thử nghiệm ATSWOOD cho thấy bột
mầm Đậu nành làm tăng trọng lượng tử cung trên cả những chuột bình thường
cũng như chuột gây giảm năng sinh dục do bị cắt bỏ hai noãn sào. Bên cạnh đó
với thử nghiệm khảo sát tác động của estradiol trên sự tăng trọng có thể sơ bộ
kết luận rằng bột mầm hạt Đậu nành có tác dụng làm giảm sự tăng trọng ở
những chuột giảm năng sinh dục do cắt bỏ 2 noãn sào.
Kết luận: Qua kết quả có được bằng các thử nghiệm trên có thể khẳng định bột
mầm hạt Đậu nành có tác dụng của một phytoestrogen.
Từ khóa: Hoạt tính estrogen, mầm hạt đậu nành, HRT, thử nghiệm ELISA,
thử nghiệm Atswood, chuột bị giảm năng sinh dục, noãn sào chuột.
ABSTRACT
ESTROGENIC-ACTIVITY TESTS OF SOYABEAN SPROUT
Nguyen Hoang Linh, Bui My Linh *Y Hoc TP. Ho Chi Minh *Vol. 14 -
Supplement of No 1-2010: 73 – 79
Introduction: Soyabean (Glycine max) is the main source of genistein
extraction. This is an estrogenic-activity isoflavonoid, used as a HRT (hormone
replacement therapy). Pharmacological tests revealed the flavonoids in
Soyabean sprouts (S.S) can Giúp in the deficient-estradiol cases on the tested
mice.
Methods & Materials: Mice, Elisa test, Atswood test and the test of estradiol
activity on the weight
Results: ELISA test proved that the utilization of S.S during 15 days only has
the effect in recovery of estradiol on the estrogen-deficiency-induced mice,
without the estrogenic-activity on the normal mice. ATSWOOD test showed
the S.S is the evidence in uterus-weight increasing not only normal but also
Besides, with the of the test mice , preliminarily conclusion the S.S have the
action of decreased-weight in estrogen-deficiency-induced, ovariectomized
mice.
Conclusion: The approved-results from above tests showed the S.S have the
action of a phytoestrogen.
Keywords: estrogenic-activity, Soyabean sprout, HRT, test ELISA, test
ATSWOOD, estrogen-deficiency-induced mice, ovariectomized mice
ĐẶT VẤN ĐỀ
Liệu pháp hormon thay thế được dùng cho những phụ nữ ở độ tuổi tiền mãn
kinh và mãn kinh(2) để hạn chế các rối loạn do thiếu estrogen gây ra.
Phytoestrogen từ hạt Đậu nành có hoạt tính tạo ra hormon nữ, giúp cho sự
hoạt động của cơ thể do có thể gắn vào thụ thể estrogen giúp cơ thể sản sinh
ra estradiol. Tác động này là do sự hiện diện của isoflavonoid có tên là
genistein (4),(5). Trong hạt Đậu nành genistein ở dưới dạng glycosid là
genistin tác động gắn kết vào các thụ thể rất hạn chế. Trong nghiên cứu này
cho thấy những enzym có trong hạt Đậu nành nảy mầm sẽ thúc đẩy sự tạo
thành estradiol trong chuột thử nghiệm đã được cắt bỏ hai noãn sào. Kết quả
thực nghiệm được đánh giá bằng test Elisa và thử nghiệm Astwood.
ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Nguyên vật liệu
Nguyên liệu dùng trong các thử nghiệm là bột định chuẩn mầm hạt Đậu
nành(6) do Công ty Nghiên cứu Sản xuất Dược liệu Miền Trung cung cấp.
Bột mịn có màu vàng hơi xanh lá, vị nhạt hơi béo, mùi thơm. Độ ẩm 4,5 %
(sản xuất ngày 25-03-2009, PKN số 4770909-HDV).
Thuốc đối chiếu dùng trong nghiên cứu là Progynova, hàm lượng 2 mg
Estradiol valerate/viên (hãng Bayer Schering Pharma).
Bộ KIT Elisa của hãng Human (Đức). Máy đọc Elisa hiệu Biotek Elx 808
(USA)
Động vật thử nghiệm
Chuột nhắt trắng giống cái, chủng Swiss albino 5-6 tuần tuổi, thể trọng trung
bình 22 ± 2g do Viện vắc xin và sinh phẩm y tế Nha Trang cung cấp. Chuột
được cho ăn uống bình thường và để ổn định ít nhất một tuần trước khi thử
nghiệm.
Phương pháp nghiên cứu
Phương pháp chung
Chỉ tiêu để đánh giá hoạt tính estrogen là định lượng hàm lượng estradiol tự
do trong mẫu huyết tương hay huyết thanh (test Elisa) (3),(1) và khảo sát sự
thay đổi của trọng lượng tử cung (test Astwood)(7). Bên cạnh đó sự thay đổi
thể trọng của thuốc thử nghiệm trước và sau khi uống thuốc cũng được ghi
nhận.
Việc đánh giá này được thực hiện trên 2 cơ địa: Động vật bình thường và
động vật bị giảm chức năng sinh dục (cắt bỏ 2 noãn sào).
Khảo sát thời điểm nghiên cứu.
Liều cho uống: qua tham khảo và thử nghiệm cho thấy LD50 đường uống của
mầm Đậu nành trên chuột nhắt trắng là 500 mg/kg, các liều thử nghiệm được
chọn là 10 mg/kg và 50 mg/kg thể trọng. Bột được hòa trong nước cất và dầu
olive. Liều uống của thuốc đối chiếu là 0,5 mg/kg thể trọng, pha trong dầu
olive.
Tiến hành: Chuột được chia thành các lô, mỗi lô từ 10-15 con.
Chuột bình thường
Lô chứng uống nước cất.
Lô thử uống bột mầm Đậu nành liều 50 mg/kg.
Lô đối chiếu uống Estradiol valerate.
Chuột gây giảm năng sinh dục tiến hành tương tự như lô chuột bình thường,
nhưng lô thử có thêm liều 10 mg/kg.
Các chuột ở 2 lô được cho uống với thể tích là 10 mg/kg/ml. Thời gian cho
uống là 15 ngày
vào buổi sáng trước khi cho ăn. Sau thời gian thử nghiệm, tiến hành xác đinh
các chỉ tiêu sau:
Hàm lượng estradiol trong huyết thanh pg/ml (test Elisa).
Trọng lượng tử cung tính bằng g% (test Astwood).
Kỹ thuật định lượng Estradiol bằng test Elisa.
Nguyên tắc: Elisa là một kỹ thuật sinh hóa dựa trên nguyên lý chính là tính đặc
hiệu của kháng nguyên (KN)-kháng thể (KT) dùng để phát hiện các kháng
nguyên hay kháng thể (ở đây KN là estrogen, KT chính là KT của estrogen
được đưa vào để phát hiện nồng độ estrogen trong mẫu) trong thử nghiệm này
estrogen trong chuột nhắt là estradiol.
Kỹ thuật định lượng estradiol dựa trên sự tương tác cạnh tranh giữa estradiol và
liên hợp enzym-hormon đối với số lượng giới hạn của các kháng thể kháng
estradiol (trích tử thỏ) được cố định sẵn trong giếng của các bộ kit. Do đó
lượng gắn của liên hợp enzym-hormon sẽ tỷ lệ nghịch với hàm lượng estradiol
trong mẫu đo.
Sau khi ủ mẫu đo và liên hợp enzym-hormon trong các giếng của bộ kit, phần
liên hợp enzym- hormon không gắn sẽ bị loại bỏ bằng dung dịch rửa. Sau khi
cho chất nền màu xanh dương sẽ xuất hiện và màu này sẽ chuyển sang màu
vàng sau khi cho dung dịch dừng phản ứng. Cường độ màu-đo bằng hệ thống
máy Elisa tự động-là tỷ lệ nghịch với hàm lượng estradiol trong mẫu (dựa theo
đường cong chuẩn estradiol ở các nồng độ tăng dần).
Mẫu máu lấy ở đuôi chuột, vào buổi sáng, được đem ly tâm, lấy phần huyết
thanh cho vào ống đã chứa sẵn EDTA, tiến hành các bước cần thiết, đo bằng
máy Elisa ở bước sóng 450 nm trong 30 phút.
Trong báo cáo này chúng tui sử dụng phương pháp Elisa ...