Link tải luận văn miễn phí cho ae Kết nối
TÓM TẮT LUẬN VĂN
Luận văn này đã tiến hành phân lập ba thành phần curcuminoid có trong bột
curcuminoid thương phẩm và xác định cấu trúc, hoạt tính của chúng.
Các kết quả thu được từ thực nghiệm:
1. Phân lập ba thành phần curcuminoid trong hỗn hợp curcuminoid ban đầu bằng
phương pháp TLC, CC, HPLC.
2. Xác định độ tinh khiết, cấu trúc và một số tính chất hóa học của các
curcuminoid phân lập được.
Khảo sát hoạt tính sinh học của hỗn hợp curcuminoid và ba thành phần curcuminoid
pheo hai phương pháp DPPH và MDA. Kết quả tất cả các mẫu đều có hoạt tính sinh
học trong hai phép thử này. CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN
1.1. Giới thiệu về curcumin
Curcumin là hợp chất được chiết từ củ nghệ (Curcuma longa L) – một loài cây phân
bố ở vùng cận nhiệt đới và nhiệt đới, chủ yếu ở châu Á và được dùng như một loại gia
vị. Curcumin có dạng bột màu vàng, là thành phần chủ yếu tạo nên màu vàng của
nghệ.[6]
Curcumin tương đối trơ và không gây độc đối với cả động vật lẫn con người ngay cả
với lượng lớn. Theo nghiên cứu, curcumin không gây độc với người với lượng lên tới
10g /ngày. [2]
Chính nhờ tính an toàn đó mà curcumin là chất có tiềm năng sử dụng trong ngành
dược. Curcumin đã được sử dụng trong thuốc truyền thống để chữa các bệnh như :
bệnh vàng da, bệnh gan, nhiễm khuẩn, bệnh về da, bong gân, viêm, bệnh cúm [5].
Trong những năm gần đây, người ta rất quan tâm đến nhiều tác dụng dược lý khác của
curcumin như: tính chống oxy hóa, chống ung thư, chống viêm, kháng khuẩn, kháng
nấm, kháng virus, chống đông máu…[2]
Hình 1.1 Cây nghệ (1) Củ nghệ; (2) Thân và lá nghệ; (3) Bột nghệ.
1.1.1. Các thành phần và các dạng đồng phân của curcumin
Thành phần của curcuminoid trên thị trường ngoài curcumin thực chất còn có một số
loại chất màu khác cùng đem lại màu vàng cho nghệ gọi chung là curcuminoid.
Curcuminoid là các dẫn xuất dicinnamoylmethane. Curcuminoid gồm3 thành phần
chính: [6]
1) Curcumin [1,7-Bis-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-hepta-1,6-diene-3,5-dione]
(công thức phân tử: C21H20O6 , khối lượng phân tử : 368) (Cur)
(1)
(3) (2) CHƯƠNG 2 THỰC NGHIỆM
2.1. Mục đích nghiên cứu
- Tách 3 thành phần riêng biệt trong hỗn hợp curcuminoid thương phẩm.
- Xác định độ tinh khiết, cấu trúc hóa học của mỗi thành phần.
- Xác định hoạt tính sinh học từng thành phần tách được.
2.2. Sơ đồ tiến hành thực nghiệm
Bột curcuminoid Chương 1: Tổng quan
Bột curcuminoid thương phẩm đầu tiên được kết tinh lại trong hệ dung môi
methanol:nước. Sau đó, cả curcumin sau kết tinh và nước cái dưới lọc đểu được chạy sắc
ký cột để tách lấy các curcuminoid thành phần. Qua sắc ký cột, curcuminoid sau kết tinh
cho nhiều curcumin và curcuminoid trong nước cái cho nhiều DMC và BDMC. Các
curcuminoid thành phần cô lập được xác định độ tinh khiết bằng TLC, đo điểm chảy,
HPLC và xác định cấu trúc bằng đo phổ UV-Vis, MS, NMR. Hoạt tính sinh học của hỗn
hợp curcuminod ban đầu và các curcuminoid thành phần được xác định bằng phương
pháp DPPH và MDA.
2.3. Phương pháp thực hiện
2.3.1. Kết tinh
2.3.1.1. Mục đích
- Làm sạch curcumin, loại bỏ một số tạp chất, các chất nhựa còn tồn tại trong
nguyên liệu.
- Thu bột curcumin đã kết tinh có hàm lượng curcumin cao và nước cái dưới lọc có
hàm lượng BMC, BDMC cao.
2.3.1.2. Nguyên tắc
Dựa vào tính tan khác nhau của các chất trong dung môi.
2.3.1.3. Phương pháp thực hiện
Hóa chất, nguyên liệu:
- Bột curcuminoid thô (Viện dược liệu, Bộ Y Tế, Hà Nội).
- Methanol 99.9% (Công ty giải pháp hóa học Vina, quận Tân Bình, TP. Hồ Chí
Minh).
- Nước cất.
Hình 2.2. Bột curcuminoid ban đầu
Phương pháp:
Bột curcuminoid thương phẩm được kết tinh lại 3 lần trong hỗn hợp methanol:nước. Các
bước thực hiện như sau:
- Hòa tan hoàn toàn 500mg bột curcumiod thô bằng một lượng tối thiểu methanol ở
60°C.
- Thêm nước cất vào cho đến khi dung dịch vừa đục.
- Cho tiếp thêm một lượng nhỏ methanol khuấy cho đến khi dung dịch trong trở lại.
- Giữ lạnh hỗn hợp ở 5°C trong 2h.
- Đem hỗn hợp sau kết tinh lọc chân không.
- Bột curcumin trên lọc được hút chân không, chuẩn bị cho giai đoạn tiếp theo.
- Nước cái dưới lọc đem đi cô quay thành dạng bột khô, hút chân không, chuẩn bị
cho giai đoạn tiếp theo.
2.3.2. Sắc ký bản mỏng (TLC)
2.3.2.1. Mục đích
- Xác định hệ dung môi để chạy sắc ký cột.
- Kiểm tra thành phần, độ tinh khiết của các hỗn hợp, các phân đoạn sắc ký cột.
2.3.2.2. Nguyên tắc Sắc ký bản mỏng là sắc ký hấp phụ được tiến hành trên một bản mỏng, chất hấp phụ là
silica gel hay oxyde nhôm cộng thêm bột bó để trải một lớp mỏng bám trên bề mặt tấm
kính.
Phương pháp này có ưu điểm: hiệu ứng tách tốt, nhạy hơn các phương pháp khác, thời
gian tiến hành nhanh, lượng chất phân tích nhỏ và công cụ đơn giản.
2.3.2.3. Phương pháp thực hiện
Dụng cụ, hóa chất:
- Bình sắc ký bản mỏng.
- Bản mỏng silica gel 60 F254 (Merck)
9 Bản mỏng khảo sát hệ dung môi: 2x10cm.
9 Bản mỏng chạy các mẫu curcuminod sau kết tinh và mẫu sau khi qua cột sắc
ký: 5x10cm.
Chiều cao triển khai bản mỏng: 8cm.
- Dung môi:
9 dichloromethane 99.5% (Shantou Vilong Chemical Factory).
9 trichloromethane 99.7% (Shantou Vilong Chemical Factory).
9 methanol 99.9% (Công ty giải pháp hóa học Vina, quận Tân Bình, TP. Hồ Chí
Minh).
9 acetone 99.7% (Công ty giải pháp hóa học Vina, quận Tân Bình, TP. Hồ Chí
Minh).
Các bước tiến hành:
- Hoạt hóa silica gel bằng cách sấy bản mỏng ở nhiệt độ 110°C trong 1h, sau đó để
cân bằng ẩm trong bình hút ẩm 30 phút.
- Chấm chất cần phân tích lên bản mỏng:
9 Hòa tan một ít mẫu curcumin vào một lượng vừa đủ acetone.
9 Vuốt ống mao quản bằng ngọn lửa đèn cồn, rửa ống mao quản 2 lần bằng
acetone.
9 Dùng ống mao quản, hút một lượng mẫu đã hòa tan rồi chấm lên bản mỏng.
Khoảng cách của vết chấm đến bờ dưới khoảng 1cm, các vết chấm cách hai bờ
Do Drive thay đổi chính sách, nên một số link cũ yêu cầu duyệt download. các bạn chỉ cần làm theo hướng dẫn.
Password giải nén nếu cần: ket-noi.com | Bấm trực tiếp vào Link để tải:
TÓM TẮT LUẬN VĂN
Luận văn này đã tiến hành phân lập ba thành phần curcuminoid có trong bột
curcuminoid thương phẩm và xác định cấu trúc, hoạt tính của chúng.
Các kết quả thu được từ thực nghiệm:
1. Phân lập ba thành phần curcuminoid trong hỗn hợp curcuminoid ban đầu bằng
phương pháp TLC, CC, HPLC.
2. Xác định độ tinh khiết, cấu trúc và một số tính chất hóa học của các
curcuminoid phân lập được.
Khảo sát hoạt tính sinh học của hỗn hợp curcuminoid và ba thành phần curcuminoid
pheo hai phương pháp DPPH và MDA. Kết quả tất cả các mẫu đều có hoạt tính sinh
học trong hai phép thử này. CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN
1.1. Giới thiệu về curcumin
Curcumin là hợp chất được chiết từ củ nghệ (Curcuma longa L) – một loài cây phân
bố ở vùng cận nhiệt đới và nhiệt đới, chủ yếu ở châu Á và được dùng như một loại gia
vị. Curcumin có dạng bột màu vàng, là thành phần chủ yếu tạo nên màu vàng của
nghệ.[6]
Curcumin tương đối trơ và không gây độc đối với cả động vật lẫn con người ngay cả
với lượng lớn. Theo nghiên cứu, curcumin không gây độc với người với lượng lên tới
10g /ngày. [2]
Chính nhờ tính an toàn đó mà curcumin là chất có tiềm năng sử dụng trong ngành
dược. Curcumin đã được sử dụng trong thuốc truyền thống để chữa các bệnh như :
bệnh vàng da, bệnh gan, nhiễm khuẩn, bệnh về da, bong gân, viêm, bệnh cúm [5].
Trong những năm gần đây, người ta rất quan tâm đến nhiều tác dụng dược lý khác của
curcumin như: tính chống oxy hóa, chống ung thư, chống viêm, kháng khuẩn, kháng
nấm, kháng virus, chống đông máu…[2]
Hình 1.1 Cây nghệ (1) Củ nghệ; (2) Thân và lá nghệ; (3) Bột nghệ.
1.1.1. Các thành phần và các dạng đồng phân của curcumin
Thành phần của curcuminoid trên thị trường ngoài curcumin thực chất còn có một số
loại chất màu khác cùng đem lại màu vàng cho nghệ gọi chung là curcuminoid.
Curcuminoid là các dẫn xuất dicinnamoylmethane. Curcuminoid gồm3 thành phần
chính: [6]
1) Curcumin [1,7-Bis-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-hepta-1,6-diene-3,5-dione]
(công thức phân tử: C21H20O6 , khối lượng phân tử : 368) (Cur)
(1)
(3) (2) CHƯƠNG 2 THỰC NGHIỆM
2.1. Mục đích nghiên cứu
- Tách 3 thành phần riêng biệt trong hỗn hợp curcuminoid thương phẩm.
- Xác định độ tinh khiết, cấu trúc hóa học của mỗi thành phần.
- Xác định hoạt tính sinh học từng thành phần tách được.
2.2. Sơ đồ tiến hành thực nghiệm
Bột curcuminoid Chương 1: Tổng quan
Bột curcuminoid thương phẩm đầu tiên được kết tinh lại trong hệ dung môi
methanol:nước. Sau đó, cả curcumin sau kết tinh và nước cái dưới lọc đểu được chạy sắc
ký cột để tách lấy các curcuminoid thành phần. Qua sắc ký cột, curcuminoid sau kết tinh
cho nhiều curcumin và curcuminoid trong nước cái cho nhiều DMC và BDMC. Các
curcuminoid thành phần cô lập được xác định độ tinh khiết bằng TLC, đo điểm chảy,
HPLC và xác định cấu trúc bằng đo phổ UV-Vis, MS, NMR. Hoạt tính sinh học của hỗn
hợp curcuminod ban đầu và các curcuminoid thành phần được xác định bằng phương
pháp DPPH và MDA.
2.3. Phương pháp thực hiện
2.3.1. Kết tinh
2.3.1.1. Mục đích
- Làm sạch curcumin, loại bỏ một số tạp chất, các chất nhựa còn tồn tại trong
nguyên liệu.
- Thu bột curcumin đã kết tinh có hàm lượng curcumin cao và nước cái dưới lọc có
hàm lượng BMC, BDMC cao.
2.3.1.2. Nguyên tắc
Dựa vào tính tan khác nhau của các chất trong dung môi.
2.3.1.3. Phương pháp thực hiện
Hóa chất, nguyên liệu:
- Bột curcuminoid thô (Viện dược liệu, Bộ Y Tế, Hà Nội).
- Methanol 99.9% (Công ty giải pháp hóa học Vina, quận Tân Bình, TP. Hồ Chí
Minh).
- Nước cất.
Hình 2.2. Bột curcuminoid ban đầu
Phương pháp:
Bột curcuminoid thương phẩm được kết tinh lại 3 lần trong hỗn hợp methanol:nước. Các
bước thực hiện như sau:
- Hòa tan hoàn toàn 500mg bột curcumiod thô bằng một lượng tối thiểu methanol ở
60°C.
- Thêm nước cất vào cho đến khi dung dịch vừa đục.
- Cho tiếp thêm một lượng nhỏ methanol khuấy cho đến khi dung dịch trong trở lại.
- Giữ lạnh hỗn hợp ở 5°C trong 2h.
- Đem hỗn hợp sau kết tinh lọc chân không.
- Bột curcumin trên lọc được hút chân không, chuẩn bị cho giai đoạn tiếp theo.
- Nước cái dưới lọc đem đi cô quay thành dạng bột khô, hút chân không, chuẩn bị
cho giai đoạn tiếp theo.
2.3.2. Sắc ký bản mỏng (TLC)
2.3.2.1. Mục đích
- Xác định hệ dung môi để chạy sắc ký cột.
- Kiểm tra thành phần, độ tinh khiết của các hỗn hợp, các phân đoạn sắc ký cột.
2.3.2.2. Nguyên tắc Sắc ký bản mỏng là sắc ký hấp phụ được tiến hành trên một bản mỏng, chất hấp phụ là
silica gel hay oxyde nhôm cộng thêm bột bó để trải một lớp mỏng bám trên bề mặt tấm
kính.
Phương pháp này có ưu điểm: hiệu ứng tách tốt, nhạy hơn các phương pháp khác, thời
gian tiến hành nhanh, lượng chất phân tích nhỏ và công cụ đơn giản.
2.3.2.3. Phương pháp thực hiện
Dụng cụ, hóa chất:
- Bình sắc ký bản mỏng.
- Bản mỏng silica gel 60 F254 (Merck)
9 Bản mỏng khảo sát hệ dung môi: 2x10cm.
9 Bản mỏng chạy các mẫu curcuminod sau kết tinh và mẫu sau khi qua cột sắc
ký: 5x10cm.
Chiều cao triển khai bản mỏng: 8cm.
- Dung môi:
9 dichloromethane 99.5% (Shantou Vilong Chemical Factory).
9 trichloromethane 99.7% (Shantou Vilong Chemical Factory).
9 methanol 99.9% (Công ty giải pháp hóa học Vina, quận Tân Bình, TP. Hồ Chí
Minh).
9 acetone 99.7% (Công ty giải pháp hóa học Vina, quận Tân Bình, TP. Hồ Chí
Minh).
Các bước tiến hành:
- Hoạt hóa silica gel bằng cách sấy bản mỏng ở nhiệt độ 110°C trong 1h, sau đó để
cân bằng ẩm trong bình hút ẩm 30 phút.
- Chấm chất cần phân tích lên bản mỏng:
9 Hòa tan một ít mẫu curcumin vào một lượng vừa đủ acetone.
9 Vuốt ống mao quản bằng ngọn lửa đèn cồn, rửa ống mao quản 2 lần bằng
acetone.
9 Dùng ống mao quản, hút một lượng mẫu đã hòa tan rồi chấm lên bản mỏng.
Khoảng cách của vết chấm đến bờ dưới khoảng 1cm, các vết chấm cách hai bờ
Do Drive thay đổi chính sách, nên một số link cũ yêu cầu duyệt download. các bạn chỉ cần làm theo hướng dẫn.
Password giải nén nếu cần: ket-noi.com | Bấm trực tiếp vào Link để tải:
You must be registered for see links