loitraitim_lt
New Member
Link tải luận văn miễn phí cho ae Kết Nối
ĐỒ - SƠ ĐỒ...............................................................................................
BẢNG KÝ HIỆU CÁC CHỮ VIẾT TẮT ............................................. VIV
MỞ ĐẦU ....................................................................................................
CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN .......................................................................
1.1. MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA HBV, HCV, HIV ................
1.1.1. Virus gây suy giảm miễn dịch ở ngƣời (HIV)..............................
1.1.2. Virus viêm gan C........................................................................
1.1.3. Virus viêm gan B ..................................................................... 1
1.2. CÁC KỸ THUẬT SỬ DỤNG TRONG SÀNG LỌC HBV, HCV, HIV
............................................................................................................. 2
1.2.1. Các kỹ thuật sàng lọc kháng nguyên HBsAg, KT-HCV, KN-KT
HIV ................................................................................................... 2
1.2.2. Các kỹ thuật sinh học phân tử NAT sử dụng trong sàng lọc máu
...................................................................................................... 251
1.3. TÌNH HÌNH SÀNG LỌC HBV, HCV, HIV TRÊN THẾ GIỚI VÀ TẠ
VIỆT NAM....................................................................................... 272
1.3.1. Tình hình sàng lọc HIV, HCV, HBV ở ngƣời hiến máu trên thế g
...................................................................................................... 272
1.3.2. Tình hình sàng lọc HBV, HCV, HIV ở ngƣời hiến máu tại Việt N
...................................................................................................... 352
CHƢƠNG 2. ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ..... 373
2.1. ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU .................................................... 373
2.2. VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU ........................................................ 373
2.2.1. Mẫu bệnh phẩm................................................................... 373
2.2.2. Hóa chất xét nghiệm............................................................ 383
2.2.3. Trang thiết bị sử dụng trong xét nghiệm.............................. 38
2.2.4. công cụ sử dụng trong xét nghiệm ...................................... 39
2.3. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU............................................... 39
2.3.1. Phƣơng pháp nghiên cứu..................................................... 39
2.3.2. Các kỹ thuật sử dụng trong nghiên cứu ............................... 39
2.3.3. Nội dung nghiên cứu ........................................................... 42
2.4. XỬ LÝ SỐ LIỆU........................................................................ 44
2.5. VẤN ĐỀ ĐẠO ĐỨC TRONG NGHIÊN CỨU........................... 44
CHƢƠNG 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN............... 46
3.1. Tỷ Lệ HBSAG, KT-HCV, KN-KT HIV DƢƠNG TÍNH ở NHM TạI VIệN
HUYếT HọC – TRUYềN MÁU TRUNG ƢƠNG NĂM 2013-2014.................. 46
3.2. Tỷ Lệ HBSAG, KT-HCV, KN-KT HIV DƢƠNG TÍNH ở NGƢờI HIếN MÁ
LầN ĐầU VÀ NHắC LạI TạI VIệN HUYếT HọC - TRUYềN MÁU TW NĂM 2013-2
......................................................................................................... 57
3.3. Tỷ Lệ HBSAG, KT-HCV, KN-KT HIV DƢƠNG TÍNH ở NGƢờI HIếN MÁ
LầN ĐầU THEO GIớI TÍNH TạI VIệN HUYếT HọC – TRUYềN MÁU TW NĂM 201
2014.................................................................................................. 60
3.4. Tỷ Lệ HBSAG, KT-HCV, KN-KT HIV DƢƠNG TÍNH ở NGƢờI HIếN MÁ
LầN ĐầU LIÊN QUAN ĐếN NGHề NGHIệP CủA NHM................................. 63
3.5. Tỷ Lệ HBSAG, KT-HCV, KN-KT HIV DƢƠNG TÍNH ở NGƢờI HIếN MÁ
LầN ĐầU LIÊN QUAN ĐếN TUổI CủA NHM.............................................. 68
3.6. Tỷ Lệ HBSAG, KT-HCV VÀ KN-KT HIV DƢƠNG TÍNH THEO SINH PHẩM
NGHIệM.............................................................................................. 72
3.7. KếT QUả SÀNG LọC NAT TạI VIệN HUYếT HọC – TRUYềN MÁU TRUNG
ƢƠNG ................................................................................................ 75
3.7.1. Kết quả sàng lọc HBV-DNA ................................................ 75
3.7.2. Kết quả sàng lọc HCV-RNA ................................................ 81
3.7.3. Kết quả sàng lọc HIV1,2 - RNA........................................... 83
KẾT LUẬN.......................................................................................... 87 Cơ chất đƣợc dùng trong phần lớn kỹ thuật ELISA là chromogen và cơ chất này
sẽ chuyển từ không màu sang có màu khi có chất xúc tác đặc hiệu, tuy nhiên xét
nghiệm hóa phát quang các hệ thống xét nghiệm chuyên dụng lại sử dụng cơ chất là
chất phát quang, loại chất phát quang thƣờng sử dụng trong xét nghiệm này là
acridium. Tuy nhiên, cácxxét nghiệm này cần có các thiết bị chuyên dụng và đắt tiền
để phát hiện tín hiệu [30], [31], [37].
Ƣu điểm và hạn chế của các kỹ thuật miễn dịch đánh dấu:
+ Ƣu điểm
- Cho phép thực hiện đồng thời nhiều mẫu. Có thể sử dụng hệ thống máy tự động ,
giảm bớt thao tác cho ngƣời làm xét nghiệm, tránh sai sót và lây nhiễm.
- Đọc kết quả bằng máy không phụ thuộc vào chủ quan của ngƣời làm xét nghiệm.
- Các máy hóa phát quang, điện hóa phát quang cho kết quả nhanh trong vòng từ
10-20 phút và có công suất khá lớn.
- Có thể lƣu các bảng kết quả và các thông số kỹ thuật thuận lợi cho việc kiểm tra
đánh giá chất lƣợng xét nghiệm [37].
+ Hạn chế
- Cần có sự đầu tƣ cho trang thiết bị ban đầu và chế độ bảo dƣỡng, hiệu chuẩn,
hiệu chỉnh máy móc định kỳ.
- Các sinh phẩm phải bảo quản ở nhiệt độ lạnh (4-80C).
- Thời gian thực hiện xét nghiệm ELISA từ 2-3 giờ.
- Chỉ thích hợp với những nơi có số lƣợng mẫu trên 40 mẫu/ngày [7], [50], [68]. 3.7. Kết quả sàng lọc NAT tại Viện Huyết học – Truyền máu trung ƣơng
3.7.1. Kết quả sàng lọc HBV-DNA
Bảng 3.23. Tỷ lệ HBV-DNA dƣơng tính trong các đơn vị máu tiếp nhận tại Viện HH
TMTW từ 19/12/2014 đến 31/6/2015
Thời gian nghiên cứu Số mẫu nghiên
cứu
HBV - DNA
Số mẫu (+) Tỷ lệ (%)
Tháng 12/2014 đến –
6/20154 141.8753.025 11307 0,079
Kết quả ở Bbảng 3.23 cho thấy qua sàng lọc 141.875 mẫu huyết tƣơng của
NHM có kết quả HBsAg âm tính với mẫu pool 4 trên hệ thống máy xét nghiệm Panther
và mẫu pool 6 trên hệ thống máy xét nghiệm Roche S201 chúng tui đã phát hiện đƣợc
113 mẫu huyết tƣơng của đơn vị máu có kết quả HBV-DNA dƣơng tính cho tỷ lệ
HBV-DNA dƣơng tính ở ngƣời hiến máu là 0,079%.
Trong nghiên cứu này của chúng tôi, tỷ lệ HBV-DNA dƣơng tính trên các mẫu
máu đã đƣợc sàng lọc âm tính với HBsAg của chúng tui cao hơn so với các kết quả của
tác giả Kleinman (Mỹ - 2003): 3,7%, Allain JP (Ghana - 2004): 12,7%, Bhattacharya P
(Ấn Độ - 2005): 21,0%, tác giả Eleptheria K (Hy Lạp - 2001): 0% và Allain JP (Anh -
2003): 0%. Kết quả nghiên cứu của chúng tui cũng phù hợp với nghiên cứu của tác giả
Stefano Dettori (Italy – 2009) cho thấy tỷ lệ HBV-DNA ở ngƣời hiến máu tại Italia là
0,07%. Điều này có thể đƣợc lý giải do tỷ lệ nhiễm virus viêm gan B trong cộng đồng
của nƣớc ta tƣơng đối cao, ở một số nhóm dân cƣ tỷ lệ này chiếm từ 8% đến 20% nên
tỷ lệ HBV-DNA tuy khá cao so với các nghiên cứu khác trên thế giới những cũng tỷ lệ
thuận với tỷ lệ nhiễm HBV trong cộng đồng của nƣớc ta (Bảng 3.24) [8].
Do Drive thay đổi chính sách, nên một số link cũ yêu cầu duyệt download. các bạn chỉ cần làm theo hướng dẫn.
Password giải nén nếu cần: ket-noi.com | Bấm trực tiếp vào Link để tải:
ĐỒ - SƠ ĐỒ...............................................................................................
BẢNG KÝ HIỆU CÁC CHỮ VIẾT TẮT ............................................. VIV
MỞ ĐẦU ....................................................................................................
CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN .......................................................................
1.1. MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA HBV, HCV, HIV ................
1.1.1. Virus gây suy giảm miễn dịch ở ngƣời (HIV)..............................
1.1.2. Virus viêm gan C........................................................................
1.1.3. Virus viêm gan B ..................................................................... 1
1.2. CÁC KỸ THUẬT SỬ DỤNG TRONG SÀNG LỌC HBV, HCV, HIV
............................................................................................................. 2
1.2.1. Các kỹ thuật sàng lọc kháng nguyên HBsAg, KT-HCV, KN-KT
HIV ................................................................................................... 2
1.2.2. Các kỹ thuật sinh học phân tử NAT sử dụng trong sàng lọc máu
...................................................................................................... 251
1.3. TÌNH HÌNH SÀNG LỌC HBV, HCV, HIV TRÊN THẾ GIỚI VÀ TẠ
VIỆT NAM....................................................................................... 272
1.3.1. Tình hình sàng lọc HIV, HCV, HBV ở ngƣời hiến máu trên thế g
...................................................................................................... 272
1.3.2. Tình hình sàng lọc HBV, HCV, HIV ở ngƣời hiến máu tại Việt N
...................................................................................................... 352
CHƢƠNG 2. ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ..... 373
2.1. ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU .................................................... 373
2.2. VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU ........................................................ 373
2.2.1. Mẫu bệnh phẩm................................................................... 373
2.2.2. Hóa chất xét nghiệm............................................................ 383
2.2.3. Trang thiết bị sử dụng trong xét nghiệm.............................. 38
2.2.4. công cụ sử dụng trong xét nghiệm ...................................... 39
2.3. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU............................................... 39
2.3.1. Phƣơng pháp nghiên cứu..................................................... 39
2.3.2. Các kỹ thuật sử dụng trong nghiên cứu ............................... 39
2.3.3. Nội dung nghiên cứu ........................................................... 42
2.4. XỬ LÝ SỐ LIỆU........................................................................ 44
2.5. VẤN ĐỀ ĐẠO ĐỨC TRONG NGHIÊN CỨU........................... 44
CHƢƠNG 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN............... 46
3.1. Tỷ Lệ HBSAG, KT-HCV, KN-KT HIV DƢƠNG TÍNH ở NHM TạI VIệN
HUYếT HọC – TRUYềN MÁU TRUNG ƢƠNG NĂM 2013-2014.................. 46
3.2. Tỷ Lệ HBSAG, KT-HCV, KN-KT HIV DƢƠNG TÍNH ở NGƢờI HIếN MÁ
LầN ĐầU VÀ NHắC LạI TạI VIệN HUYếT HọC - TRUYềN MÁU TW NĂM 2013-2
......................................................................................................... 57
3.3. Tỷ Lệ HBSAG, KT-HCV, KN-KT HIV DƢƠNG TÍNH ở NGƢờI HIếN MÁ
LầN ĐầU THEO GIớI TÍNH TạI VIệN HUYếT HọC – TRUYềN MÁU TW NĂM 201
2014.................................................................................................. 60
3.4. Tỷ Lệ HBSAG, KT-HCV, KN-KT HIV DƢƠNG TÍNH ở NGƢờI HIếN MÁ
LầN ĐầU LIÊN QUAN ĐếN NGHề NGHIệP CủA NHM................................. 63
3.5. Tỷ Lệ HBSAG, KT-HCV, KN-KT HIV DƢƠNG TÍNH ở NGƢờI HIếN MÁ
LầN ĐầU LIÊN QUAN ĐếN TUổI CủA NHM.............................................. 68
3.6. Tỷ Lệ HBSAG, KT-HCV VÀ KN-KT HIV DƢƠNG TÍNH THEO SINH PHẩM
NGHIệM.............................................................................................. 72
3.7. KếT QUả SÀNG LọC NAT TạI VIệN HUYếT HọC – TRUYềN MÁU TRUNG
ƢƠNG ................................................................................................ 75
3.7.1. Kết quả sàng lọc HBV-DNA ................................................ 75
3.7.2. Kết quả sàng lọc HCV-RNA ................................................ 81
3.7.3. Kết quả sàng lọc HIV1,2 - RNA........................................... 83
KẾT LUẬN.......................................................................................... 87 Cơ chất đƣợc dùng trong phần lớn kỹ thuật ELISA là chromogen và cơ chất này
sẽ chuyển từ không màu sang có màu khi có chất xúc tác đặc hiệu, tuy nhiên xét
nghiệm hóa phát quang các hệ thống xét nghiệm chuyên dụng lại sử dụng cơ chất là
chất phát quang, loại chất phát quang thƣờng sử dụng trong xét nghiệm này là
acridium. Tuy nhiên, cácxxét nghiệm này cần có các thiết bị chuyên dụng và đắt tiền
để phát hiện tín hiệu [30], [31], [37].
Ƣu điểm và hạn chế của các kỹ thuật miễn dịch đánh dấu:
+ Ƣu điểm
- Cho phép thực hiện đồng thời nhiều mẫu. Có thể sử dụng hệ thống máy tự động ,
giảm bớt thao tác cho ngƣời làm xét nghiệm, tránh sai sót và lây nhiễm.
- Đọc kết quả bằng máy không phụ thuộc vào chủ quan của ngƣời làm xét nghiệm.
- Các máy hóa phát quang, điện hóa phát quang cho kết quả nhanh trong vòng từ
10-20 phút và có công suất khá lớn.
- Có thể lƣu các bảng kết quả và các thông số kỹ thuật thuận lợi cho việc kiểm tra
đánh giá chất lƣợng xét nghiệm [37].
+ Hạn chế
- Cần có sự đầu tƣ cho trang thiết bị ban đầu và chế độ bảo dƣỡng, hiệu chuẩn,
hiệu chỉnh máy móc định kỳ.
- Các sinh phẩm phải bảo quản ở nhiệt độ lạnh (4-80C).
- Thời gian thực hiện xét nghiệm ELISA từ 2-3 giờ.
- Chỉ thích hợp với những nơi có số lƣợng mẫu trên 40 mẫu/ngày [7], [50], [68]. 3.7. Kết quả sàng lọc NAT tại Viện Huyết học – Truyền máu trung ƣơng
3.7.1. Kết quả sàng lọc HBV-DNA
Bảng 3.23. Tỷ lệ HBV-DNA dƣơng tính trong các đơn vị máu tiếp nhận tại Viện HH
TMTW từ 19/12/2014 đến 31/6/2015
Thời gian nghiên cứu Số mẫu nghiên
cứu
HBV - DNA
Số mẫu (+) Tỷ lệ (%)
Tháng 12/2014 đến –
6/20154 141.8753.025 11307 0,079
Kết quả ở Bbảng 3.23 cho thấy qua sàng lọc 141.875 mẫu huyết tƣơng của
NHM có kết quả HBsAg âm tính với mẫu pool 4 trên hệ thống máy xét nghiệm Panther
và mẫu pool 6 trên hệ thống máy xét nghiệm Roche S201 chúng tui đã phát hiện đƣợc
113 mẫu huyết tƣơng của đơn vị máu có kết quả HBV-DNA dƣơng tính cho tỷ lệ
HBV-DNA dƣơng tính ở ngƣời hiến máu là 0,079%.
Trong nghiên cứu này của chúng tôi, tỷ lệ HBV-DNA dƣơng tính trên các mẫu
máu đã đƣợc sàng lọc âm tính với HBsAg của chúng tui cao hơn so với các kết quả của
tác giả Kleinman (Mỹ - 2003): 3,7%, Allain JP (Ghana - 2004): 12,7%, Bhattacharya P
(Ấn Độ - 2005): 21,0%, tác giả Eleptheria K (Hy Lạp - 2001): 0% và Allain JP (Anh -
2003): 0%. Kết quả nghiên cứu của chúng tui cũng phù hợp với nghiên cứu của tác giả
Stefano Dettori (Italy – 2009) cho thấy tỷ lệ HBV-DNA ở ngƣời hiến máu tại Italia là
0,07%. Điều này có thể đƣợc lý giải do tỷ lệ nhiễm virus viêm gan B trong cộng đồng
của nƣớc ta tƣơng đối cao, ở một số nhóm dân cƣ tỷ lệ này chiếm từ 8% đến 20% nên
tỷ lệ HBV-DNA tuy khá cao so với các nghiên cứu khác trên thế giới những cũng tỷ lệ
thuận với tỷ lệ nhiễm HBV trong cộng đồng của nƣớc ta (Bảng 3.24) [8].
Do Drive thay đổi chính sách, nên một số link cũ yêu cầu duyệt download. các bạn chỉ cần làm theo hướng dẫn.
Password giải nén nếu cần: ket-noi.com | Bấm trực tiếp vào Link để tải:
You must be registered for see links